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液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異

點擊次數(shù):1192 發(fā)布時間:2021-05-08
  液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異,如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的組分與固定相相互作用。
  液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預處理技術(shù)相配合,HPLC所達到的分辨率和靈敏度,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有分辨率、靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等點,因而被應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到的發(fā)展。
  為了液相色譜儀使用的穩(wěn)定性,我們對于設備使用環(huán)境是有一定要求的,包括:通風、照明、供電、環(huán)境溫度和濕度以及潔凈度,其中:
  1、通風:使用液相色譜儀分析過程中,由于流動相中含有揮發(fā)性有機溶劑(甲醇、乙睛等)會產(chǎn)生有害氣體,對儀器中的光學元件帶來腐蝕,應注意儀器室的通風,以排除室內(nèi)有害氣體、保持空氣清。通風主要有兩種方式:一種自然通風,定時打開門窗,讓內(nèi)外空氣對流;另一種是制通風,如用通風柜、排風扇等,及時將有害氣體排出室外。
  2、照明:室內(nèi)照明要光線適中,避免陽光直射。為避開直射光線對儀器操作、觀測的影響,儀器(顯示屏)應側(cè)向光線。實驗室窗戶要掛窗簾,以便隨時調(diào)節(jié)光照度。
  3、供電:液相色譜室應設有照明電源和動力電源,動力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾,儀器應遠離瞬時供電的大功率電器設備,如大型電動設備、電梯、空調(diào)系統(tǒng)等。為HPLC泵的晶度,必須要穩(wěn)定的輸人電壓,為此,建議色譜室應設有和儀器負荷相當?shù)姆€(wěn)壓電源。
  4、環(huán)境溫度和濕度:適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩(wěn)定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動太大,否則,在開機分析時會影響色譜分離,夏季一定要控制室溫不要過30℃,溫度太會使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡,影響檢測器的正常工作(如熒光檢測器)。室內(nèi)相對濕度應控制在60%以下。
  5、潔凈度:懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會對色譜儀器分析帶來干擾,使本底和噪聲升,成為分析測試的污染源,直接影響純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。

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